花叶香蒲的组织培养和植株再生

1 材料与方法 999苗木网,999miaomu.com

　　取花叶香蒲的茎尖和幼嫩心叶，经千分之一升汞常规消毒后，无菌水冲洗干净后，将茎尖逐层剥去叶片至5mm左右大小，心叶取基部，切成1.0cm×1.0cm大小方块，分别接种于各种待试培养基上，置于光环境和暗环境中培养。
　　培养环境温度为25℃，光培养光照时间10小时，光照强度2500LX。 中国苗木网,999miaomu.com

2 结果与讨论

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2．1 茎尖培养
　　茎尖在光照培养条件下，6天后开始出现褐化现象，12天可见心叶开始抽生，呈淡黄色，部分茎尖基部开始肿大，18天开始抽生第2片小叶，苗高达3.5cm，在MS+6-BA0.5+NAA0.1和MS+6-BA0.5+NAA0.1。MS+6-A0.5+NAA0.1培养基上部分茎尖基部有愈伤发生，呈黄色，较疏松，25天开始抽生第三片小叶，愈伤长大，无分化；暗培养条件下，8天后开始出现褐化现象，12天可见心叶萌动，15天个别基部有肿大现象，21天抽生第二片小叶，25天在MS+6-BA0.5+NAA0.1培养基上部分分化苗有根发生。
　　从表1可以看到，在附加激素6-BA为0.5~1.5mg/L或KT为0.5~2.0mg/L和NAA为0.1~0.5mg/L范围内，花叶香蒲的茎尖都能成活并正常生长成苗。当6-BA浓度达2.0mg/L，有玻璃化苗发生，而使用KT时，未见玻璃化现象。
2.2 叶片培养
　　从表2可以看到，花叶香蒲叶片培养的褐化情况较为严重，分化率低；使用KT作为附加细胞分裂素和在暗培养的条件下，可部分减轻褐化现象的发生。过高的激素水平虽可促使愈伤的发生，但不利于愈伤的生长，甚至会导致愈伤的褐化死亡，而在低水平激素条件下，愈伤生长缓慢。
　　综上所述，可见花叶香蒲的离体繁殖材料以茎尖为好，在添加适量外源生长激素的情况下可一次成苗，在添加6-BA为0.5~1.5mg/L或KT0.5~2.0mg/L和NAA0.1~1.0mg/L的MS培养基上，离体培养均可获得成功，光照条件能促进茎尖的生长发育，但会加重褐化现象的发生。

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表1 不同培养条件下花叶香蒲茎尖培养的分化情况 中国苗木网,www.999miaomu.com

培养条件 999中国苗木网,www.999miaomu.com

附加激素配比

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材料数 999中国苗木网,999miaomu.com

污染数

褐化（死亡）数

分化数

分化率（%）

备注

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光培养

6-BA2.0+NAA1.0

15

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2

6

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4

57.1 999苗木网,www.999miaomu.com

有玻璃化苗发生

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6-BA1.5+NAA0.5

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15 中国苗木网,www.999miaomu.com

0

3 中国苗木网,999miaomu.com

6

50.0 999苗木网,www.999miaomu.com

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6-BA1.0+NAA0.2

15

2 999中国苗木网,www.999miaomu.com

4

8

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72.3 999中国苗木网,999miaomu.com

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6-BA0.5+NAA0.1

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15 999苗木网,999miaomu.com

5

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2 苗木网,999miaomu.com

4 999中国苗木网,www.999miaomu.com

50.0 苗木网,www.999miaomu.com

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KT2.0+NAA1.0

15 999苗木网,www.999miaomu.com

2 999中国苗木网,999miaomu.com

0 999中国苗木网,999miaomu.com

9

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55.6 999苗木网,999miaomu.com

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KT1.5+NAA0.5 中国苗木网,999miaomu.com

15

5 999苗木网,www.999miaomu.com

2

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5

60.0

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KT1.0+NAA0.2

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15 999苗木网,www.999miaomu.com

3 999苗木网,www.999miaomu.com

1

6

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62.5

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KT0.5+NAA0.1 999苗木网,www.999miaomu.com

15 中国苗木网,www.999miaomu.com

2 苗木网,www.999miaomu.com

1 苗木网,www.999miaomu.com

3 999苗木网,www.999miaomu.com

55.6 999中国苗木网,999miaomu.com

暗培养

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6-BA2.0+NAA1.0

15 999苗木网,999miaomu.com

1

4

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8 中国苗木网,www.999miaomu.com

25.0 中国苗木网,999miaomu.com

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6-BA1.5+NAA0.5

15 999中国苗木网,999miaomu.com

1 中国苗木网,www.999miaomu.com

3

6

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80.0 苗木网,www.999miaomu.com

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6-BA1.0+NAA0.2 999中国苗木网,www.999miaomu.com

15

0

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3 中国苗木网,www.999miaomu.com

7

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58.3 中国苗木网,999miaomu.com

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6-BA0.5+NAA0.1

15 999苗木网,999miaomu.com

4 999苗木网,www.999miaomu.com

0 999苗木网,www.999miaomu.com

6 999中国苗木网,999miaomu.com

55.6

有生根现象发生 999苗木网,999miaomu.com

表2 不同培养条件下花叶香蒲叶片培养的分化情况 苗木网,999miaomu.com

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培养条件

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附加激素配比 苗木网,999miaomu.com

材料数

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污染数

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褐化（死亡）数

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分化数 999中国苗木网,www.999miaomu.com

分化率（%）

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备注

光培养

6-BA1.0+NAA0.5 999中国苗木网,999miaomu.com

30

12

15 999中国苗木网,www.999miaomu.com

0 苗木网,www.999miaomu.com

0

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6-BA0.5+NAA0.5 999中国苗木网,www.999miaomu.com

30

9 999苗木网,999miaomu.com

13 999中国苗木网,www.999miaomu.com

1 苗木网,www.999miaomu.com

12.5

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6-BA0.1+NAA0.2 中国苗木网,www.999miaomu.com

30 中国苗木网,www.999miaomu.com

3 999中国苗木网,999miaomu.com

13

4 中国苗木网,999miaomu.com

28.5 苗木网,www.999miaomu.com

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6-BA0.1+NAA0.1 999苗木网,999miaomu.com

30

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7 苗木网,999miaomu.com

15 999中国苗木网,www.999miaomu.com

3 苗木网,www.999miaomu.com

37.5 999中国苗木网,www.999miaomu.com

分化愈伤生长缓慢

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KT1.0+NAA0.5

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30 苗木网,www.999miaomu.com

7 中国苗木网,www.999miaomu.com

12 999中国苗木网,www.999miaomu.com

2

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18.2

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KT0.5+NAA0.5 999苗木网,999miaomu.com

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3

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8

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6 999苗木网,999miaomu.com

31.6

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KT0.1+NAA0.2

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30

3

11

3

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18.8

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分化愈伤生长缓慢 苗木网,999miaomu.com

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KT0.1+NAA0.1 苗木网,www.999miaomu.com

30

5 999苗木网,999miaomu.com

5 999中国苗木网,999miaomu.com

1 中国苗木网,999miaomu.com

5.0

分化愈伤生长缓慢 苗木网,www.999miaomu.com

暗培养 999苗木网,999miaomu.com

6-BA0.1+NAA0.5 苗木网,999miaomu.com

30 999苗木网,999miaomu.com

6 中国苗木网,www.999miaomu.com

14

3 中国苗木网,999miaomu.com

33.3

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培养后期愈伤部分死亡 苗木网,999miaomu.com

6-BA0.5+NAA0.5

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30 中国苗木网,999miaomu.com

7 苗木网,www.999miaomu.com

14 999苗木网,999miaomu.com

0

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0 999中国苗木网,999miaomu.com

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6-BA0.1+NAA0.2

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8 中国苗木网,999miaomu.com

11

0

0

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6-BA0.1+NAA0.1

30

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5 999中国苗木网,www.999miaomu.com

17

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2 苗木网,999miaomu.com

25.0

分化愈伤生长缓慢

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　　此外，本文只对花叶香蒲离体培养作了一个初步的探讨，关于愈伤的培养状况、引起褐化的原因及解决方法等其它方面有待作进一步研究。
作者：林 鸿1 刘锦兰2 张雄胜1 潘宜平1
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参考文献 苗木网,www.999miaomu.com

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［4］ 李永丽，李欣，李硕，等. 东方香蒲（Typha orientalis Presl）对铅的富集特征及其EDTA效应分析。生态环境，2005，14（4）：555~558.
［5］ 张，卢雪峰，李 翼.香蒲对硒元素的富集及对氮. 磷的吸收作用.科技通报，2002，18（6）：511~514. 中国苗木网,www.999miaomu.com