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组织培养技术在百合生产中的应用

来源：作者：发布时间：2013-07-27 11:52

百合的繁殖一般采用小鳞茎、鳞片、珠芽等器官进行无性繁殖。其缺点是繁殖系数低，长期无性繁殖还会导致病毒积累引起品种退化。在百合研究生产中，已利用组织培养技术进行快速繁殖，以解决引种过程中，由于无性繁殖系数低造成的难于快速扩大推广的困难。我国上海百合试管苗早已出口荷兰。在新品种培育、茎尖脱毒苗培养上，组织培养也是有效方法。 1．外植体百合的鳞茎盘，鳞片、珠芽、叶片、茎段、花器官各部和根等等，用作外植体，都有能分化成苗。各种外植体培养时，都可切割成5-8毫米左右的小块或切段。 2．材料消毒洗净的材料，先用70%的酒清浸摇30-60秒，然后用饱和漂白粉上清液或0.1%升汞溶液消毒10-20分钟（视材料健幼而异），无菌水漂洗4-8次，即可按无菌操作切块（段）接种。花器官等培养时，常取未开放的花蕾，消毒后切开，取其内材料接种。 3．培养条件温度20-25℃，光照800-1200lux，每天9-14小时照明，培养基PH值为5.6-5.8。 4．培养基和培养结果一般用琼脂固体培养基，常用配方是MS+蔗糖或白糖30克/升，按需加入各种植物激素。（1）无菌种子播种用1/2MS，不加任何激素。种子可萌发为无菌实生苗。（2）鳞片、叶片培养用MS+BA 0.1~1.0+NAA0.1~1.0毫克/升。对于不同种或品种的百合，激素含量与种类不同，以后鳞片或叶片都可产生小鳞茎状突起而分化成苗。在高NAA低BA的培养基上，可1次形成完整植株，但幼苗根部有肿胀现象。相反，高BA低NAA时，能形成大量小鳞茎状突起，从中分化出芽而无根。这样的苗子可转入生根培养基上（MS+IAA1+BA0.2，或MS+NAA0.8~1.0毫克/升+BA0.2毫克/升，培养基PH值为5.8。或用NAA、IBA代替IAA），使其壮苗生根。杜永芳等采用ABT生根粉替代NAA和IBA，对百合组培苗有良好的发根效果，最适浓度为0.3毫克/升。将生根的植株直接移入营养钵中易于成活。（3）茎段、花柱和珠芽的培养用MS+IAA1+BA0.2毫克/升，可以直接分化出芽。在花器官中以花丝为材料，优于花柱和子房。麝香百合花器培养的植株，生长约6个月以后，即可开花。（4）根的培养以毛百合根为材料，在MS+NAA0.5~1.0毫克/升的培养基上，形成肿胀的粗根，将其切成小段，转到MS+BA2+NAA0.2的培养基上培养，便能分化出苗。而轮叶百合在上述培养基上不形成肿胀的根段。毛百合试管苗经5-6个月后，能形成直径17毫米左右的鳞茎，移栽后成活情况良好。一些品种如Rainbow hybrid和Pink perfection的试管苗移栽后一年半，即开出大而美丽的花朵。（5）胚培养培养时仍以MS培养基较好，蔗糖浓度视种类而异，常在20-40克/升间。PH什以5.0较为适宜，NAA用量只宜在0.01-0.001克/升间，加入适量BA有利幼胚成活。高BA会抑制胚根的产生，并促进胚组织愈伤组织化。通常先用MS+BA1+NAA0.1培养促进愈伤组织生长，然后将长大的愈伤组织转移到1/2MS不加任何激素的培养基上，约2个月后，可形成大量的不定芽，延长培养时间，就会生根，产生出完整的杂交后代。（6）百合无病毒培养百合主要受花叶病毒等侵染，引起品种退化，鳞茎变小。培育无病毒苗仍是当前防治病毒的有效方法。因为病毒在植物体上的分布是不均匀的。幼嫩的茎尖分生组织中病毒含量微少。甚至不含病毒植株。取材：在消毒的百合嫩梢上取0.2-0.3毫米的茎尖分生组织，或先进行鳞片培养（通过砂培或试管培养），待形成小球茎后，在其上剥离分生组织进行培养。培养：接种好的百合茎尖分生组织，通常置于25-28℃的温度，光照强度初期1000-1500勒克斯、后期3000勒克斯，16/8小时的光暗周期的条件下培养。采用过的培养苗有： White、Barker、Kassanis、改良Ms以及Nielsen等。（记者佚名）中国苗木网,www.999miaomu.com

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