朱顶红的组织培养技术

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    (1)愈伤组织的诱导

    配制初代培养基：初代培养基的主要植物需要成分有大量元素、微量元素、有机成分、激素和蔗糖，准确量取培养基的各成分，并充分混合成混合溶液；然后溶解琼脂，待完全溶化后加入混合溶液、蒸馏水至刻度线，最后将培养基的pH值调至5.8。最适不定芽诱导培养基为MS+0.5mg/LKT+0.5mg/L6-BA，不定芽增殖培养基为MS+1.5mg/LKT+0.05mg/L6-BA，不定根培养基为MS+0.3mg/LNAA。分装培养基：分装引流时要确保培养基不污染瓶口，分装好的培养基做好记号放置于高压灭菌锅中灭菌，放置培养基时不要倒置以免培养基倒流出来。 999中国苗木网,999miaomu.com

    (2)选择

    露地栽培生长健壮的幼龄小球为材料，先在室内消毒过的珍珠岩基质中栽植30天，待新根长出以后，取出用自来水冲净表层，用手术刀去除须根、叶和鳞茎上部的鳞片，只保留鳞茎盘。清理好的鳞茎盘用自来水冲洗干净，并用滤纸吸干水分置于超净工作台上备用。在接种前先用75%的酒精浸泡鳞茎盘30～60秒，用无菌水冲洗一次，然后用0.1%的氯化汞溶液消毒15分钟，最后用无菌水浸泡3～5次、每次5～10分钟，并用无菌镊子不断搅动，去除残留在外植体上的氯化汞。将消毒好的材料放在无菌滤纸上吸干水分，切成5mm×5mm×5mm大小的外植体块接种于已配制好的培养基中，一瓶培养基只接种一个切块。接种好的外植体放置在培养室中培养。培养温度为20～25℃，每天光照时间为10～20小时，光照强度为1000—20001x。愈伤组织块不能切得太小，否则分化会太慢；若愈伤组织块太大很快就会长满瓶，不易取出，故其大小要适宜。 苗木网,www.999miaomu.com

    (3)不定芽的生根培养 苗木网,999miaomu.com

    将继代培养好的小芽切下分别接种于的培养基中。在操作过程中一定要将小芽基部的愈伤组织切除干净，否则根会长在愈伤组织上，影响其成活率。

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    (4)生根小苗的移栽 苗木网,999miaomu.com

    试管苗不经过生根可以直接出瓶。小苗生根后先打开瓶口，让小苗在室外适应外界环境，2～3天后取出瓶苗，洗净瓶苗基部的琼脂，最后将小苗移栽至壤土∶腐叶土∶河沙为5∶3∶1(体积比)基质中，成活率可达98%。在洗苗过程中一定要洗净琼脂，防止滋生微生物。 苗木网,999miaomu.com

    (5)朱顶红取材最好在生长旺盛的春季，以确保其具备较强的分生能力。 中国苗木网,www.999miaomu.com

    在培养过程中发现朱顶红的鳞片与鳞片之间的夹层有凸起出现，上部产生数个小仔球，小仔球上部逐渐变绿，将独立的小仔球转入继代培养基中数日后形成小球丛。朱顶红比较容易感染病菌，最常见的是红斑病。取材时须取无病虫害的部位，或引进种子在试管中播种，生根发芽后再进行培养。若材料丰富，可在解剖显微镜下剥取茎尖的途径来获得无病毒的材料。但此方法会使生长点长得很慢，周期很长，一般从诱导至生根培养需90～120天。据本试验观察发现，组培苗具有一定的驯化现象，经过长时间的继代培养后，只要加入极少量激素也可以达到一开始培养的效果；在炼苗过程中，发现球根花卉一般比较容易成活，试验认为，朱顶红不经过生根可以直接移入基质中，成活率可达98%；朱顶红在组织培养中，芽增殖率高，球小，须进行壮苗培养以后生根，但在增殖培养基MS+lmg/LKT+0.1mg/LNAA中产生不定根，无需进行生根培养；朱顶红的生长需要充足的光照，光照适宜，叶大、厚、肥且具有光泽，花大且艳；光照不足则抽出的花葶开不出花，由顶部花苞逐渐向下枯萎，叶子细且失去光泽、失绿；朱顶红具有很强的向光性。在朱顶红组培中，要特别注意试验的激素配比，在MS+1mg/LKT+0.1mg/LNAA的培养基中既生根又长芽，愈伤组织很少；只加糠基腺嘌呤不长根。结果认为分裂素与生长素比值小，有利于生根，相反则分化形成芽或愈伤组织。朱顶红组培苗炼苗在带有防虫网的玻璃温室内进行，基质要进行消毒，先用甲醛密封熏蒸7天，再打开让甲醛彻底挥发，装入营养钵内待用。 中国苗木网,www.999miaomu.com