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我国是世界竹子的分布中心和世界竹类的研究 中心，在观赏竹子的研究与利用方面有着悠久的历 史，形成了独特的竹文化。随着经济的发展，人们物 质生活水平和审美水平的不断提高，竹子已经成为最 佳的园林植物之一。用于观赏和园林绿化的地被类 竹主要有铺地竹、菲白竹、菲黄竹和翠竹等，其中以菲 白竹最为市场接受。
菲白竹(Sasa fonunei)_l J属于混 生小型竹。竿高20～30 cm，最高可达50 cm，径粗2 ～ 3 mIn，竹鞭的直径3～5 mIn，叶绿色夹有白色条纹， 极具观赏价值。耐修剪，为优良的地被类观赏竹 种[ 。目前，菲白竹的繁殖方法为传统常规的种竹带 鞭移栽技术，虽然带鞭移栽技术简单易行，但母竹耗 量大，用地多，生产成本高，难以快速规模化发展资 源。技术简便、省时省力的扦插技术也受生根率、繁 殖速度、季节等影响。因此，常规繁殖方法不仅繁殖 系数低，而且难以在短时间内大量生产优质竹苗，远 远满足不了市场的需要。利用植物组织培养微繁技 术，可以依靠其增殖速度快的特点在短时期内，周期 性地实现菲白竹的快速繁殖 。 999中国苗木网,www.999miaomu.com
菲白竹的组织培养微繁技术是指在无菌条件下，利用植物体的一部分， 如芽，在人工控制的营养和环境条件下繁殖竹苗的方 法。组织培养微繁殖速度快，首先反映在增殖方式 上，只要建立起了菲白竹的快速繁殖体系，一株菲白 竹1 a内可扩繁至1万株；其次是在环境限制方面，由 于培养环境几乎恒定，由此可进行周年生产；同时，由 于环境、养分等繁殖条件差异较小，苗木生长具有较 高的一致性，也就具有较高的商品性 。
1 材料与方法
1．1 试验材料 试验用外植体为菲白竹枝条；移栽用基质为蛭 石、营养土；供试激素为6一BA，KT，NAA。
1．2 方 法
1．2．1 无菌系统的建立
(1)取材时间：外植体的取材分别于出笋当年的 秋季9～11月及第2年的春季2～3月进行。
(2)取材方法：从田问生长健壮，性状典型的菲白 竹植株上剪取当年生未展叶、枝芽饱满新秆，放入牛 皮纸袋中，带回实验室。 中国苗木网,999miaomu.com
(3)材料灭菌：将带回实验室的材料，先用自来水 初步冲洗干净，然后将之剪为长3～5 cm含芽的节 段，经洗涤剂浸泡15 min后，流水冲洗1～2 h。最后 转入无菌操作台进行灭菌。采用75％乙醇30 s和 0．11％ 升汞5～8 rain的消毒，无菌水冲洗4～5次后，切除节段的两端，留取1．0～1．5 cm含芽的节作 为外植体，接种到初始培养基MS+6-BA 1．0 mg／L+ 3．0％蔗糖。30 d后将无菌苗转入继代培养基。
(4)培养条件：接种有外植体的培养瓶，置于培养 室中，每天光照12～14 h，光照强度1 200～1 500 lx。 培养室温度25～30cc。
1．2．2 继代增殖培养
用于菲白竹继代增殖培养的基本培养基为MS 培养基。培养基中分别附加不同浓度及配比的细胞 分裂素和生长素。细胞分裂素种类及使用浓度为：6- BA(1．0、2．0、3．0、4．0、5．0mg／L)；KT(0．1 mg／L)；生 长素NAA(0．01 mg／L)。培养基中均加入浓度为3％ 的蔗糖，pH值为5．8，以琼脂为凝固剂。约每隔25 d 转继代1次。 999中国苗木网,www.999miaomu.com
1．2．3 生根培养
将用于生根的菲白竹丛生芽约15个为1丛，转 接至生根培养基上。用于菲白竹组培苗生根的基本 培养基为3／4MS培养基。培养基中分别附加有6一BA (0、1．0 mg／L)与NAA(0．02、0．1、0．2 mg／L)，共6种 配方，每种配方接种48瓶。蔗糖浓度为2．5％，pH值 为5．8，以琼脂为凝固剂。
1．2．4 瓶苗移栽
在室外平均温度达到20cc以后，进行瓶苗移栽。 瓶苗移栽前，先打开瓶盖置于温室中炼苗5 d左右， 注意保湿。然后取出小苗，洗去沾在根系上的琼脂， 及时移栽到基质中，做好水分管理。
2 结果与分析
2．1 不同取材时期对污染率的影响
研究结果表明，由于用于菲白竹组培微繁的外植 体是带有节的芽，相对于其他植物，外植体较大，不易 灭菌，因而无菌系统的建立相对不易，主要表现为高 污染率，．菲白竹于4月上旬开始出笋长竹，6～7月 份旺盛生长，当年12月至第2年3月处于休眠状态。 研究表明，不同取材时期所取的菲白竹的芽，经相同 灭菌方法处理培养1个月后，污染率明显有差异。9 ～ 11月份取当年出笋长成的新秆接种的菲白竹外植 体，无菌材料的获得率40％ ～50％ ，而于春季2～3 月取上年出笋长成的新秆接种的菲白竹外植体，无菌 材料的获得率只有5％～15％。9～11月份新秆上的 芽处于生长分化初期，带菌少，灭菌较容易；而到了第 2年的春季2～3月，新秆上的芽经过了一个冬天，携 带了大量的病菌，灭菌困难，因此，于春季2～3月取 材接种的外植体污染率明显高于9～11月的。 中国苗木网,www.999miaomu.com
2．2 不同激素水平对继代增殖培养的影响
2．2．1 不同激素水平对芽增殖的影响 不同激素浓度对菲白竹芽增殖有不同的效果。
图1 不同激素水平培养基对芽增殖率的影响 经过长达1 a芽继代增殖培养表明，在不同浓度6一BA 培养基中芽的分化程度有所不同，表现在不同培养基 中芽的平均增殖率有较大差异(见表1、图1)。
从：表1及图1中可以看出，随着培养基中细胞分 裂素6一BA浓度从1 mg／L提高到3 mg／L，菲白竹的芽 增殖率从1．0左右迅速提高至3．0左右；当6一BA浓 度超过3 mg／L之后，菲白竹的芽增殖率不再有明显 的提高 可见，在低浓度6一BA培养基中，芽增殖速 度较慢，在高浓度6一BA培养基中，芽增殖速度较快； 但芽丛的生长状况会出现衰退现象，有时还会出现形 态变异的芽丛。附加了生长素NAA(0．01 mg／L)之 后，对菲白竹的芽增殖率没有明显的影响，但经观察 对培养壮苗有一定作用。而当培养基中6一BA浓度 低于2 mg／L时，培养基中附加了KT(0．1 mg／L)后，对芽增殖有促进作用。当培养基中6一BA浓度高于 3 mg／L时，附加的KT(0．1 mg／L)，已看不到这种促进 作用。综合考虑上述各种情况，为达到在最低成本下 获得量多质好的瓶苗，选择菲白竹最适宜的继代增殖 培养基为3号MS+6一BA 3．0 mg／L+NAA 0．01 mg／L 和8号Ms+6一BA 3．0mg／L，两者交替使用。 中国苗木网,999miaomu.com
2．3 芽苗的变异
在多次继代后，尤其是在高浓度的6一BA培养基 中，正常生长的菲白竹芽丛中出现两种叶色变异的芽 苗，原有的绿白相间的条纹消失，一种芽苗的叶片变 为全绿，而另一种芽苗变为白化苗。将它们从正常生 长的芽丛中分离出，分别培养在3号培养基中，再经 多次转基后，白化苗的增殖率不断降低，生长势渐弱， 呈现退化生长。叶片为全绿的绿叶菲白竹增殖率可 保持在1．8左右，并且生长良好，经过近1 a的转基培 养，仍保持较恒定的芽增殖率及旺盛生长势。
2．4 生根培养
2．4．1 激素对生根的影响
当瓶苗数量达到计划的基数后，就可进入了生根 培养。一部分瓶苗继续用于增殖培养，一部分用于生 根。菲白竹组培苗生根比较容易，在增殖培养基MS +6一BA 3．0mg／L+NAA 0．01 L中就已观察到有 少量芽苗生根。参照此配方设计了2种处理、3个水 平共6种生根配方的生根培养基，芽丛转人生根培养 基30 d后，瓶苗的生根情况见表2。 999苗木网,999miaomu.com
表2表明，随着培养基中NAA浓度从0．02 mg／L 增加到0．1 m L，菲白竹芽苗的生根率从90％左右 提高到100％，平均根长也有所增加，增长幅度最为 明显的是每瓶苗丛的平均生根数。在2种处理中，平 均生根数分别从3．1条增加到6．2条和4．8条增加到 9．5条，增长率达到了100％。当培养基中NAA浓度 从0．1 mg／L增加到0．2mg／L，菲白竹芽苗的生根率、 平均根长及平均每丛生根数均没有明显的增长。
从表2中还可看出，在添加了6一BA 1．0 mg／L的 生根培养基中的平均生根数分别为4．8、9．5和9．8条，显著高于没有添加6一BA 1．0 mg／L的生根培养基 中的生根数。这是由于6一BA的加入促进了新芽的 形成，而菲白竹组培苗的根均由新芽上生成的。综上 所述，菲白竹生根的最佳培养基为MS+6一BA 1．0 mg／L+NAA 0．2 mg／L。 2．5 瓶苗移栽 经炼苗后的生根瓶苗移栽到下列3种环境中：一 是具全自动间隙喷雾装置和遮阴棚的扦插池，基质为 蛭石，喷雾时间与间隔的长短视天气状况进行调整， 以竹苗叶面及基质保持湿润为准；二是塑料大棚里的 营养钵中，基质为熟土+蛭石(1：1)，每日喷水4次； 三是塑料大棚里的营养钵中，基质为蛭石，每日喷水 4次。约28 d后，菲白竹组培苗在3种环境中均有新 根产生，移栽成活率分别为91．2％、47．5％和72．1％。 可见，将炼苗后的瓶苗移栽到基质为蛭石、有全自动 间隙喷雾装置和遮阴棚的扦插池中，成活效果最好。 苗木网,999miaomu.com
3 结语
在进行菲白竹组织培养微繁生产时，适宜在9 11月份进行外植体接种，外植体选择当年生秆上分 化良好、生长健壮的芽。用于芽继代增殖适宜培养基 为MS+6一BA 3．0 mg／L+NAA 0．01 m#L和MS+6一 BA 3．0 mg／L，二者交替使用对培养壮苗更有利。适 宜的生根培养基为3／4MS+NAA0．2 L+2．5％ 蔗 糖。移栽的瓶苗在有全自动间隙喷雾装置、基质为蛭 石且具遮阴棚的扦插池中，成活效果最好。 999苗木网,www.999miaomu.com
参考文献
[1]耿伯介，王正平．中国植物志(第九卷第一分册)[M]．北京：科学 出版社，1996．
[2]张新明．观赏竹在园林绿化中的功用及其发展方向[J]．竹子研究 汇刊，1999，18(4)：24—26．
[3]张春霞，谢寅峰，张幼法，等．竹子组织培养研究的进展及应用前 景[J]．竹子研究汇刊，1999，18(3)：46—49．
[4]谭文涔，戴策刚．观赏植物组织培养技术[M]．北京：中国林业出 版社，1991． 999中国苗木网,www.999miaomu.com
作者:张春霞 王福升 黄月英 (1南京林业大学竹类研究所2福建省三明市三元区林业局) 999中国苗木网,999miaomu.com
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