无菌接种组培

　　1、外植体的选取及预处理
　　⑴外植体选取
　　选取生长健壮、已发芽、长势较好、无病害的植物带芽的枝条作为外植体。
　　⑵材料预处理
　　取带芽的枝条，用洗衣粉适量冲洗，然后扳取或用清洁剪刀剪取带芽部位（约1cm×1cm大小），顶芽和腋芽、大芽和小芽分开。继续用洗衣粉清洗10分钟，清洗时需不停晃动。再用自来水冲洗干净，置空培养瓶备用。
　　2、外植体消毒
　　⑴蒸馏水冲洗
　　外植体置于已杀菌开机的超净工作台上，新洁尔灭洗液消毒双手，用无菌蒸馏水清洗外植体2-3次，需晃动。
　　⑵酒精消毒
　　75%酒精倒入装外植体的容器内，消毒外植体30-60s，时间长短视植物材料情况而定。动作一定迅速，需晃动。然后将酒精倒去。
　　⑶升汞消毒
　　1%生汞倒入装外植体的容器内，消毒外植体5-10min，时间长短视情况而定。需晃动，在最后3min静置，升汞注满容器，将已灼烧的镊子放入容器升汞内浸泡。
　　⑷蒸馏水清洗
　　用镊子将外植体取出，放入另一无菌蒸馏水瓶中清洗，反复清洗4次。
　　⑸茎尖的剥离
　　用灼烧冷却的镊子和剪刀对外植体进行处理，剥离外植体材料芽外部小叶片，露出尖端生长点和2-3片叶原基部分，将此部分剪下做培养材料。再用无菌蒸馏水清洗3-4次。 999苗木网,999miaomu.com
　　⑹接入培养基
　　培养基瓶放入工作台内，将剥离的材料分别用消毒过的镊子放入培养瓶内，盖上瓶盖，置培养篮内，写上培养时间、操作人及培养品名，入培养室培养。