春兰,自古以来,以其优雅之香、优美之叶和分布广泛,一直倍受人们推崇,并成为东洋兰系的代表种。现代,又因艺叶和奇花的发现,引起了人们极大的兴趣。但是,和其它东洋兰一样,因其自然分蘖繁殖速度极为缓慢,使得许多兰花爱好者难以拥有自己所喜爱的品种。
现在,这个问题通过组织培养已能得到解决。在春兰为代表的东洋兰组培中,一般要经过这样几个阶段:1.地下茎的形成。2.地下茎的增殖。3.从地下茎形成具有叶。根和假鳞茎的完整组培苗。因此,其总的培养过程较之卡特兰等西洋兰有很大的差异,而且培养的时间要长得多。
下面就介绍组织培养的基本过程。
(一)组织培养的方法
1.材料。
采用茎顶培养的材料一般选取健壮无病株的一年生植株,在腋芽膨大的三、四月间采取。
2.杀菌和采芽。
将假鳞茎在叶的基部2-知cn处切去根、剥去时。在自来水中充分冲洗后,在5%的重氯酸钠或亚酸钙中消毒10分钟,移人无菌操作台内,用灭菌水冲洗三次,然后用滤纸吸去水分,置人表面皿中。 苗木网,999miaomu.com
采取腋芽茎顶时,将假鳞茎以腋芽相对一倒,用2枚大头针固定在橡胶栓上,后在实验显微镜下,将腋芽鳞片、叶片依次用解剖刀剥去,切取腋芽项端1-2mm长度的组织。腋芽切取一般以假鳞茎下部腋芽为佳。
运用尚未展叶的假鳞茎,切取其茎顶组织,其操作方法与切取腋芽组织类似,只是在橡胶栓上固定的角度稍有不同。用些材料培养,其地下茎的形成要较腋芽为材料的要低。
3.培养基
一般使用添加NAAIPPM、KTO.lppm的Ms培养基,但因春兰不同品种对培养基质反应不同,最适宜的培养基配方仍须在实践中探索。另外,春兰培养一般使用含有琼脂的固体培养基为宜。
4.着床
切取的茎顶应立即将其切断面与培养表面密着,而且用塞子将试管密封。因地下茎形成时间较长,因试管密封环节必须高度重视。
5.培养条件。
根据试验,在25℃条件下,黑暗状态比照明状态下地下茎的形成要高,且初期生长快。一般在茎顶着床3O—45日后能用肉眼观察到地下茎,但到完全形成却需3个月左右时间。 999中国苗木网,999miaomu.com
6.地下茎的增殖和继代。
在地一下茎长至约1cm长度时,应将其移植到微通气寒栓封日的增殖培养基中,在500-1000lux光条件下培养。为利于增殖,培养容器一段采用5O0ml的三角烧瓶,内注人150-200nl的培养基。培养基可选用添加NAAO.SPPmr的京都培养基。
7.假鳞茎的形成
从地下茎先端到假鳞茎形成约需一年时间,培养基一般采用添加1PPm的NAA、2PPm的BA的Ms培养基。至含3一5片叶,1-3条根的假鳞整形成后可切离移栽。
8.驯化。
从试管中移出的幼苗可移植到水苔、云母或其它春兰用土中。驯化一般采用两个阶段,第一阶段为开始的l-2个月,在驯化室中进行,其条件类似于培养室;第二阶段则是近于一般种植的兰室,但要求做到弱光、多湿、适温条件。
二、艺叶的发现。
根据部分实验室培养的结果,不同的艺叶品种经过组织后具有明显的差异,对于艺叶的代表种类覆轮、中透缟、虎斑来说,各具有这样的特点。
1.覆轮:在组织过程中能形成两种地下茎。绿色的地下茎能形成与亲本完全一样的植株;黄白色的地下茎则不能形成正常的植株,也难以产生正常的地下茎。
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2.中透缟。不能形成含有亲本色艺的艺叶,组培苗全部是正常绿叶的植株。因此,中透缟在目前无法通过组培来繁殖。
3.虎斑。在培养过程中斑艺往往难以表现,这主要是光线不足的缘故。在植株移栽后,只要予以适当的条件,新萌发的假鳞茎能表现出与亲本完全一致的植株,其成功率约为3O%。
(记者 佚名) 999苗木网,999miaomu.com
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