矮一串红的离体快繁技术

一串红(Ｓａｌｖｉａｓｐｌｅｎｄｅｎｓ),又称西洋红、墙下红,属唇形科(Ｌａｂｉａｔａｅ)鼠尾草属(ＳａｌｖｉａＬ)。矮一串红是普通一串红杂交所得的Ｆ1代,其株形美观,花色艳丽,花期长,可盆栽欣赏又可用于布置花坛、道路、庭院,具有较高的观赏价值和经济价值(柯合作,1998)。  苗木网,www.999miaomu.com

　　矮一串红种子发芽率低,扦插不易生根,因此种子繁殖和扦插繁殖难以满足市场的需求。有关一串红的组织培养,除袁巧平、董茂山等(1988)用一串红花枝诱导丛生芽使之长根形成完整植株外,至今未见其他报道。本试验拟以矮一串红带腋芽的茎段为外植体,探究外植体的最适消毒时间,不同种类和浓度的生长调节剂对芽增殖的影响,为矮一串红的工厂化生产提供技术参考。 

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1　材料与方法 

1 1　材料  999中国苗木网,www.999miaomu.com

　　本试验的矮一串红为农友种苗(中国)有限公司提供的种子播种产生的Ｆ1代植株。于2000年10月,取带腋芽的茎段为外植体。  999中国苗木网,999miaomu.com

1 2　培养基设计  999中国苗木网,www.999miaomu.com

　 　初代培养基　Ｎ1:ＭＳ+ＢＡ0 5+ＮＡＡ0 01　Ｎ2:ＭＳ+ＢＡ1 0+ＮＡＡ0 01　Ｎ3:ＭＳ+ＢＡ0 5+ＮＡＡ0 1;继代培养基:Ｎ4:ＭＳ+ＢＡ1 0+ＮＡＡ0 1　Ｎ5:ＭＳ+ＢＡ3 0+ＮＡＡ0 1　Ｎ6:ＭＳ+ＢＡ5 0+ＮＡＡ0 1;生根培养基　Ｓ1:1/2ＭＳ+ＩＢＡ0 5　Ｓ2:1/2ＭＳ+ＮＡＡ0 5　ＣＫ:1/2ＭＳ。以上培养基ｐＨ值均为6 0,琼脂浓度为0 8%,蔗糖浓度为2%。 

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1 3　外植体的消毒与接种  苗木网,www.999miaomu.com

　　将矮一串红的嫩茎去除叶片后切成3～4ｃｍ长的茎段→流水冲洗→加洗衣粉刷洗2～3ｍｉｎ冲净→70%酒精消毒30ｓ→0 1%升汞消毒6～10ｍｉｎ→无菌水浸洗5次→切取长0 5～1 0ｃｍ的带腋芽茎段接种→初代培养→切取无根苗的茎段→增殖培养→芽苗生根。  999中国苗木网,999miaomu.com

1 4　培养条件 

　　温度25±2℃,光照强度为1000～1500ｌｘ,光照时间为12ｈ/ｄ。  苗木网,www.999miaomu.com

1 5　观察记载的方法  苗木网,999miaomu.com

　　接种后每5ｄ观察一次,对成活数、萌芽数、芽的长度、生根数等项目进行记载。 

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2　试验结果 

2 1　不同消毒时间对矮一串红外植体成活率的影响以0 1%升汞为表面消毒剂,不同消毒时间对外植体成活率有较大影响,接种20ｄ后观察发现,处理6ｍｉｎ的外植体,茎段仍保持绿色,长出的芽较健壮;处理8ｍｉｎ的外植体虽然大部分都能萌发,但芽体弱小;处理10ｍｉｎ的外植体切面变黑,整个材料焦黄萎缩,虽然小部分长出芽但芽较短小。从表1可以看出,外植体消毒6ｍｉｎ,成活率和萌芽数均大于8ｍｉｎ和10ｍｉｎ。消毒时间过长(10ｍｉｎ),外植体吸收较多的升汞,引起毒害,成活率、萌芽数下降。因此外植体的最适消毒时间为6ｍｉｎ。 

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2 2　培养基中不同生长调节剂组合对腋芽萌发的影响培养基中不同生长调节剂和浓度对矮一串红腋芽萌发有较大影响,结果见表2。由表2可见,当ＮＡＡ浓度为0 01ｍｇ/ｌ,ＢＡ浓度为0 5～1 0ｍｇ/ｌ时,外植体萌芽数随ＢＡ浓度升高而增加,以ＢＡ1 0ｍｇ/ｌ为最多。但其诱导的芽节间长,叶片短,长势弱;ＢＡ浓度为0 5ｍｇ/ｌ时,虽然萌芽数略低于ＢＡ1 0ｍｇ/ｌ,但芽的长势较壮。因此,腋芽萌发的最适ＢＡ浓度当为0 5ｍｇ/ｌ。而当ＢＡ浓度(0 5ｍｇ/ｌ)一定时,ＮＡＡ的浓度对萌芽数影响不大,但ＮＡＡ为0 1ｍｇ/ｌ时芽生长比ＮＡＡ0 01ｍｇ/ｌ健壮。由此可见,矮一串红无菌系建立的适宜培养基为ＭＳ+ＢＡ0 5+ＮＡＡ0 1。  苗木网,999miaomu.com

2 3　芽苗的增殖情况将无菌苗切成0 5～1 0ｃｍ带腋芽的茎段,接种到含不同生长调节剂组合的培养基上诱导芽的增殖,结果见表3。由表3可见:ＮＡＡ为0 1ｍｇ/ｌ时,ＢＡ浓度高低对丛生芽的形成有较大影响。当ＢＡ为1 0～3 0ｍｇ/ｌ时,随着ＢＡ浓度的升高,芽的增殖系数逐渐增加,但达到一定浓度(5ｍｇ/ｌ)后,就会抑制芽的增殖,增殖系数显著下降。 

2 4　不同种类生长素对芽苗生根的影响将丛生芽分割下来接种到含不同种类生长素的培养基上,研究不同种类生长素对生根效果的影响,结果见表4。由表4可见,2种生长素均能诱导生根,生根率达100%。ＩＢＡ诱导的根呈放射状,主根不明显,根较细长。而ＮＡＡ诱导的根,主根与须根分明,主根粗壮,长势较好。因此ＮＡＡ诱导生根效果比ＩＢＡ好。 

3　讨论  苗木网,www.999miaomu.com

3 1　不同消毒时间对外植体成活率和萌芽率的影响以0 1%升汞为外植体的表面消毒剂,消毒时间长短对外植体的成活和生长有较大影响。消毒时间适合,升汞只起表面消毒作用。时间太长,外植体吸入升汞量较多,轻则对外植体产生毒害,抑制细胞分裂和新陈代谢,使芽苗生长减弱;重则使外植体中毒死亡。  中国苗木网,www.999miaomu.com

3 2　不同生长素组合对芽苗增殖的效果在组织培养过程中,芽苗的发育受到细胞分裂素与生长素比例高低的调控,细胞分裂素能诱导不定芽形成,削弱顶端优势,促进侧芽的萌发;而生长素能促进细胞伸长,加强顶端优势。当细胞分裂素与生长素浓度比例适当时,两者能互相协同作用,有利于不定芽的形成与促进丛生芽的抽生。在本试验中当ＮＡＡ的浓度为0 1ｍｇ/ｌ时,在ＢＡ1 0～3 0ｍｇ/ｌ范围,不定芽与丛生芽的形成随着ＢＡ浓度的升高而增加,并以3 0ｍｇ/ｌ最好;当ＢＡ浓度达5 0ｍｇ/ｌ时,对芽的形成起抑制作用。 

3 3　不同种类生长素对矮一串红芽苗生根的影响在诱导生根试验中,生长素的参与能诱导维管束的形成,促进根原基分化,使之具有分生能力的细胞,最终形成根(徐福寿,1992)。所以,ＮＡＡ和ＩＢＡ的加入均能诱导生根。在本试验中ＮＡＡ诱导生根的效果比ＩＢＡ好,主要由矮一串红本身的品种特性和ＮＡＡ的活性高于ＩＢＡ所决定