南芥菜花叶病毒防治 |
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来源: 作者: 发布时间:2013-07-23 16:33 |
南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)属豇豆花叶病毒科Comoviridaex线虫传多面体病毒属Nepovirus,是我国二类检疫性植物病毒,在世界各地都有分布,寄主范围也较广,约有170多属、200多种,包括了蔬菜、瓜果、花卉、豆类等几大类经济作物,近年检疫部门就曾在进口的葡萄种苗、水仙球茎[和郁金香球茎上检测出该病毒。我国幅员辽阔,气候条件的复杂多样性,使得有些地区的气候状况很可能适宜ArMV的繁殖,为了防止ArMV传入我国造成巨大的经济损失,最有效的方法就是建立快速准确的检测方法,目前对ArMV的检测主要是采用酶联免疫法。 基本信息 学名 Arabis mosaic nepo virous 异名 Raspberry yellow dwarf virus ,Rhabarber mosaic virus (rhubarb mosaic virus) 英文名 Arabis mosaic nepo virous 分类地位 线虫等多面体病毒组 分布:ARMV主要发生在比利时,保加利亚,前捷克斯洛伐克,丹麦、法国、德国、匈亚利、爱尔兰、意大利、卢森堡、荷兰、波兰、罗马尼亚、瑞典、瑞士、英国、前苏联、前南斯拉夫、日本、南非、加拿大、澳大利亚和新西兰 999苗木网,www.999miaomu.com 寄主植物 约174属,215种。为害主要作物有黄瓜、莴苣、芹菜、胡萝卜、芦苇、香石竹、水仙、郁金香、茉莉、唐菖蒲、卷丹、月季、常春滕、矮牵牛、福绿考、瑞香、大麻、薄荷、啤酒花、甜菜、烟草、草木樨、樱桃、桃、葡萄、草莓、悬钩子、大簧、辣根、西洋接骨木、树番茄、白蜡树、橄榄、玫瑰、红醋栗、马铃薯、菠菜、白菜、花椰菜、芜菁、芥菜、菜豆、豇豆、蚕 豆、碗豆、大豆等。 ARMV自然侵染野生和栽培的单子叶、双子叶植物,人工机械接种能侵染28科93种双子叶植物。ARMV还能侵染裸子植物美国扁柏的根,也能侵染草本试验寄主,但不同分离物致病性有差异。 鉴别寄主:苋色藜、昆诺阿藜、黄瓜、烟草、菜豆、矮牵牛 繁殖寄主:矮牵牛、光里夫氏烟 试验寄主:苋色藜、黄瓜 主要寄主:草霉、啤酒花、芍药属、悬钩子、大黄属和接骨木 其它寄主:于甘菜、芹菜、水仙、欧洲女、辣根、自三叶草、唐昌蒲属、辣椒、莴苣、以及一些栽培品种和野生品种。 鉴定特性 葡萄上表现"软皮"和茎沟槽症状。悬钩子黄矮。草莓花叶和黄化绉缩。黄瓜上病叶表现黄色斑点,绿色部分呈不正常的黑色,花"软木化"并且不形成果实。莴苣上表现为矮化,褪绿,坏死和心部退化。啤酒花(蛇麻草)根部表现为不正常的黑色,且叶子变小。树番茄上早春表现为轻微褪绿环斑驳,以后随着季节的延续逐渐消失,果实症状为黄色褪绿斑驳。欧洲白蜡树的叶子上表现为褪绿斑驳,叶形呈锯齿状或栎树叶状。烟草表现环斑,叶片缺刻破损,心叶卷曲。 999苗木网,999miaomu.com 危害情况 ArMV为RNA等径粒子,直径为30nm,分生在欧洲,寄主范围广,侵染许多寄主植物的种子,易汁液传播.由线虫Xiphinema diversican datum 传播。 主要表现为叶片斑驳、点斑、矮化以及畸形(包括耳突),不同寄主上的症状表现不同,而且随株系,栽培品种、季节以及年份不同而变化。 ARMV引起悬钩子黄矮,草霉花叶黄皱叶,黄瓜矮化斑驳,莴苣褪绿、 矮化,芹菜矮化坏死,连翘黄果,大黄花叶症状。ARMV在很多植物上引起症状,包括甜菜啤酒花,辣根,水仙,玫瑰,欧洲女贞、白三叶草,芍药属等。芍药属植物感染此病毒很普遍,包括芍药扇叶病毒。芍药扇叶病毒与南芥菜花叶病毒血清学有差异。ARMV与李矮缩病毒或者李属坏死环斑病毒混合侵染樱桃,产生“樱桃锉叶病”。 形态特征 粒子特性: ARMV粒子等大,有三种沉降组份:外壳蛋白T组份,和两个核蛋白组份(M和B)。T ,M, B沉降系数:53,93,126。 粒子结构: 病毒粒子等径,直径为30nm,五或六角形,外壳蛋白由42个亚基组成,负染色后电镜下观察到有些粒子是完整的,有些是部分的,有些无插入,可能对应于T,M,B组份。 999苗木网,www.999miaomu.com 粒子组份: ARMV是单链RNA双分体基因组病毒,两种RNA分 别为 和 ,分别占粒子重量的 和 。蛋白质:外壳蛋白分子量为 。 株系: 许多分离物除致病性有微小差异外,其它与典型摸学没有区别。而啤酒花株系只侵染草本试验寄主中的苋色藜和昆藜,血清学上与典型株系有差异。 生物学特性 病毒粒体为球状正二十面体,直径为25~30nm,外观有5或6个角,蛋白质外壳有42个形态亚基组成。ArMV为单链RNA病毒,核酸大约占粒体重的27%(M)和41%(B),RNA基本比率为A=24.9%,C=25.6%,G=21.6%, U=27.9%。 蔗糖密度梯度离心后,病毒制剂可分为三层,最上层(T)为蛋白外壳,没有侵染性,而下面两层(M和B)有侵染性,且显示出典型的核蛋白吸收光谱。 A2650/A280比率底部成分为1.71±0.03,顶部成分为1.56±0.06。沉降系数为 53S(T)、93S(M)、126S(B)。 矮牵牛的病汁液致死温度为55~61℃,稀释终点为10-3~10-5,体外存活期室温下为1~2周,有些毒株在室温下汁液的存活时间较长。 株系有葡萄株系(典型株系),黄瓜株系,水仙株系,卷丹株系,啤酒花株系和白芷株系。 中国苗木网,www.999miaomu.com ArMV有较强的免疫原性,注射兔子可获得滴度较高的抗血清,应用细胞融合技术已获得了单克隆抗体。 生物学 稳定性: 矮牵牛感病汁液,55~61 ,放10分钟,室温下存放1~2星期或稀释 倍后,病毒丧失侵染性。有些株系室温下存活期稍长。 血清学:的抗血清较易获得,试管沉定试验,微沉定试验,1%凝胶扩散试验效果都不错,胶扩散试验中,病毒产生一条沉淀线。 相关性: 通过血清学测试,ARMV大多株系间存在近缘血清学关系。啤酒花线形株系在胶扩散试验中与模式株系有差异,但差异程度未见报道。Harrison(1958)发现ARMV不同株系间有交叉保护现象,但Jha(D1961)认为交叉保护是不完全的。 Schmelzer(1963)发现南芥菜花中病毒间交叉保护现象比番茄黑环病毒间的交叉保护现象强。ArMV与芍药扇叶病毒(grapevine fanleaf virus,GVFLV)有远缘血清关系。 传播途径 介体传播: 模式株系由土壤线虫Xiphinema diversicaudatum 和X.coxi传播。X.diversicauolatum的幼虫和线虫都能传播ARMV,但线虫不能自母代传王子代,且病毒随线虫脱皮而排除。线虫从受侵染植物根部获毒只需一天(获毒伺育期一天),接毒伺育期为三天。线虫在休耕土壤中生长可保毒至少31天,在对ArMV免疫的悬钩子品种中可持毒8个月以上。 中国苗木网,www.999miaomu.com 种子传播: 至少有12科15种植物能通过种子传播ArMV,有些寄主中,10%以上甚至100%传给后代。许多植物种传获侵染后,症状不明显,对于无性繁殖的农作物如啤酒花、芍药等,这种传播途径不重要。 其它的传播途径:植物无性繁殖材料是该病毒最主要的传播途径。种植期间,ArMV侵染可能是随机分布的,也可能是呈块分布,或者两者都有,随机分布是由于使用了部分受害植物材料恩赐 块分布是因为传毒线虫在土壤中不规则分布,或由于种用部分受害植物材料使获毒的线虫分布不均所至。 在田间,很少发现该病毒在植物间的接触传播,尽管在啤酒花上发现花粉传染现象,但没有证据说明带毒花粉能够侵染健康植株。 对于非栽培植物,首先是种子传毒,其次是通过线虫进行短距离的传播。 检疫与防治 检疫方法: 1、 鉴别寄主反应 昆诺阿藜和苋色藜上首先出现局部褪绿,然后系统斑驳;黄瓜表现局部褪绿斑,然后系统性黄斑或沿脉变色,植物停止生长;烟草、自肋烟表现褪绿或坏死斑,有些株系产生系统性黄环、黄斑、线形病毒侵染后长出的叶片无症。 菜豆上表现微弱褪绿坏死斑,后系统性坏死、畸变。 999苗木网,www.999miaomu.com 矮牵牛上表现局部褪绿斑或坏死环,接着系统明脉,褪绿环、线虫换行。但是,并非所有毒株(如啤酒花株系ArMV-H)都产生这些明显症状,或所有传染都能产生症状,基于这种原因,又由于ArMV通常是和草莓潜环斑病毒(SLRV)混合侵染,并具有相同的线虫介体且产生长相似的症状,因此利用血清学鉴定更为准确。 2、 血清学检测 从多克隆抗血清中获得IgG进行EUSA试验已广泛用于病毒检测上,单克隆抗体也已制备出来。有一种单克隆抗体能够专一检测来自比利时引起啤酒花“刺头病”的ArMV-H,另一种单克隆抗体用于检测从不同植物上分离到的11种ArMV株系,前者不能检测德国ARMV-H,或者至少对其中有些分离物不能检测。 3、 免疫电镜检测 ArMV也可利用免疫电镜时行检测,甚至是对单个线虫检测,这种方法比普通电镜至少灵敏1000倍以上。 4、 抗体修饰法 抗体修饰法也是一种常用检测手段,利用这种方法可以将ArMV与同组其他病毒区分。 5、 其它方法 侵染啤酒花的英国ArMV-H其分子结构中含有额外的卫星核酸,可应用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测。另一种检测方法是利用cDNA克隆斑点杂交试验,这种方法至少已在两个实验中建立. 中国苗木网,www.999miaomu.com 防治方法: 防治ArMV的根本办法是对植物材料进行脱毒处理,并严格执行检疫证书管理制度,在线虫污染地区种植脱毒菌株,如果没有其他辅助方法,还不能进行彻底防治;辅助方法有土壤熏蒸或土地至少休耕一年,这样可以较好地控制病害传播.有些植物如Pholx paniculata有抗性品种,对于那些重要经济作物,培育抗病品种是一种积极的对策。 检疫措施: 植物材料只能来自有严格检疫证书管理制度的果园,幼株不带土壤,以防传毒线虫介体。 接种鉴别 寄主昆藜(Chenopodium ouinoa)或苋色藜(C.amaranticolor)接种后 4~6天出现局部褪绿,系统褪绿斑驳,顶枯。接种番杏后4~6天,接种叶片出现褪绿点,直径约1~2mm,以后发展成中空的圆形坏死环斑,环纹细,然后融合成片,其后长出的叶片无症。 血清学检测 琼脂双扩散法:适宜检测鉴别寄主的有病症组织,植检实验所抗血清的最适稀释度用1/40~1/80,病汁用原液;SPA-ELISA:适宜测大量样品,第一抗体用1/2000稀释度的抗血清,第二抗体用1/1000,病汁用1/50~1/100;免疫电镜:用1/1000抗血清诱捕,1/20修饰;检测ArMV的具体程序为:大量样品先经SPA-ELISA检测,阳性者再接种鉴别寄主,同时制片做电镜观察及琼脂扩散,其中3项为阳性,确认受ArMV侵染。 999中国苗木网,999miaomu.com 有关检疫规定 南芥菜花叶病毒是我国公布的《中华人民共和国进境植物检疫危险性病、虫、杂草名录》中规定的二类危险性病毒,应严格限制传毒种苗的引进数量。必须引进的种苗应由出口国出具检疫证书,进口后在检疫圃内试种、检查和鉴定,对传毒介体亦应严格检疫。 |
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